珍妮最早饰演的电视剧角色为美国肥皂剧《As the World Turns》中的Vi Kaminski, 以及《Guiding Light》中的Ginger。1994年，她出现在美国电视剧《法律和秩序》的最后一季，饰演一名针对一帮俄罗斯嫌疑犯的证人。
珍妮还在多部电影中担纲不同的角色，例如20世纪90年代的电影《美国丽人》, 《欲擒故纵》, 《今晚大件事》, 《双傻出海》, 《美丽比一比》, 《冰风暴》, 《风起云涌》, 《我恨你的十件事》， 以及《隐私部分》。之后的电影包括《急救爱情狂》, 《时时刻刻》,《我行我素》, 《初恋十五十六时》, 《冬至》 以及动画片《海底总动员》中为海星Peach配音。2006年，洁妮为电影动画片《Margaret》和《篱笆墙外》担任重要配音角色。
1999年，她开始在电视剧《白宫风云》中饰演白宫新闻发言人C. J. Cregg, 赢得四项艾美奖。其中两项是2000年2001年的最佳女配角奖；2002和2004年的最佳女主角奖。由于电视剧大部分外景地位于华盛顿，洁妮经常周末前往华盛顿，并曾数次拜访当时克林顿政府的新闻发言人Dee Dee Myers(1993-1994年在任）。
《白宫风云》的拍摄于2006年1月结束，最后一集于2006年5月播映。即使该剧播出后期，评分逐渐下降，但是珍妮的表演一直颇受赞扬。美国《娱乐周刊》称她的表演为“本剧亮点”，“非常漂亮、具有超凡的表现力”。
2017年11月，艾莉森·珍妮凭借《我，花样女王》获得第21届好莱坞电影奖最佳女配角奖。同年10月26日，与梅利莎·拜诺伊斯特合作出演由詹妮弗·莫里森执导的电影《幻日奇遇》在奥斯汀电影节上映，并于2018年4月6日在美国上映。
2018年1月，凭借《我，花样女王》获得第75届金球奖电影类最佳女配角奖；1月12日，凭借该片获得第23届评论家选择奖电影类最佳女配角奖；3月5日，凭借该片获得第90届奥斯卡金像奖最佳女配角奖。11月8日，确定主演动作惊悚片《卢》（Lou）。
2019年，主演新片《心》（The Heart）。2019年5月31日，与奥克塔维亚·斯宾瑟合作出演的电影《马大姐》在美国上映。10月11日，其配音的动画电影《亚当斯一家》上映，她为亚当斯一家的死敌玛格尼德乐配音。
2020年，主演的电影《尤巴县突发新闻》上映。
